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產(chǎn)品中心

當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞
小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞的相關(guān)*:組織甘油-3-脫氫-1(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-1)活性光譜法定量檢測試劑盒 20次
細(xì)胞甘油-3-脫氫-2(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-2)活性比色法定量檢測試劑盒 20次
組織甘油-3-脫氫-2(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-2

產(chǎn)品廠地:上海市
更新時間:2025-02-26
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:394
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品牌其他品牌貨號GOY-01X0917
規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0917

商品介紹:

名稱    小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞   

2.組織來源:腎動脈組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞分離自腎動脈組織;腎動脈的分支為葉間動脈,穿行于腎柱內(nèi),上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處,形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細(xì)血管,并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈,進(jìn)入腎小囊后形成球形的毛細(xì)血管網(wǎng),再匯集成出球小動脈,出腎小體。直小動脈分支形成毛細(xì)血管網(wǎng),再匯合成直小靜脈,入弓狀靜脈、葉間靜脈,最后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎,注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管,又是腎的機(jī)能血管,與腎泌尿機(jī)能密切相關(guān)。腎動脈在腎實(shí)質(zhì)內(nèi)形成兩個毛細(xì)血管網(wǎng):腎小球毛細(xì)血管網(wǎng),血壓較高,利于血漿濾過形成原尿;球后毛細(xì)血管網(wǎng),血壓較低,利于腎小管的重吸。腎動脈平滑肌細(xì)胞是腎動脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號CM-M061

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳3代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠 LCN2 / NGAL 基因全長ORF克隆

小鼠 MCSFR / CSF1R 基因全長ORF克隆

小鼠 Integrinalpha11 基因全長ORF克隆

小鼠 MEP1A 基因全長ORF克隆

小鼠 sFRP-5 基因全長ORF克隆

小鼠 IL34 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

小鼠 Integrinbeta1 基因全長ORF克隆

小鼠 sFRP-4 基因全長ORF克隆

小鼠 SCARB2 基因全長ORF克隆

小鼠 LGMN / AEP 基因全長ORF克隆

小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞0.156-10 ng/mL 人白介素17受體B(IL17RB)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL 漢坦病毒通用型(HTV-U)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, testis-specific form, mitochondrial

0.156-10 ng/mL 人線粒體假定ATP依賴Clp蛋白水解蛋白亞基(CLPP)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Interleukin-13 receptor subunit alpha-2

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Type II iodothyronine deiodinase

萬古0.66mg 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:0.66mg*5

0.156-10 ng/mL 人整合素α5(ITA5)ELISA試劑盒

78-5000 pg/mL 人活化凝血因子Ⅻa(FⅫa)ELISA試劑盒

1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human HLA class II histocompatibility antigen gamma chain

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